水蛭细胞的特异性酶解

水蛭细胞的特异性酶解(任务书,开题报告,论文9000字)
摘 要
首先对从水蛭中获得水蛭素的不同种方法进行了简述,本文选取酶解法来提纯水蛭素,根据文献确定了酶解工艺以及各种参数,选取了多种单一酶以及一种混合酶体系对水蛭细胞进行了水解。通过实验结果的对比确定一种更好的水蛭酶解方法,从而使所得的水蛭素的产率、抗凝血活性更佳。最终得到结果:胰蛋白酶在反应条件为反应温度58℃,酶底比6.5%,反应时间5h时为最佳酶解条件。
关键词:水蛭 细胞酶解 蛋白酶 水蛭素
Hydroquinone specific enzymatic hydrolysis
Abstract
First of all, it briefly describes different methods for obtaining hirudin from leeches. This article selected enzymatic hydrolysis method to purify hirudin, according to the literature to determine the enzymolysis process and various parameters, a variety of single enzymes and a mixed enzyme system were selected to hydrolyze leech cells. By comparing the experimental results, a better method of enzymatic hydrolysis of leeches is determined, so that the yield of hirudin and the anticoagulant activity obtained are better. The final result: trypsin in the reaction conditions of the reaction temperature of 58 °C, enzyme bottom ratio of 6.5%, the reaction time of 5h is the best conditions for enzymatic hydrolysis.
Key Words: Leech; Enzymatic hydrolysis; Protease; Hirudin
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目 录
摘要…………………………………………………………………………………Ⅰ
ABSTRACT………………………………………………………………………Ⅱ
第一章 绪论………………………………………………………………………1
1.1 水蛭简介……………………………………………………………………1
1.2 水蛭的有效成分……………………………………………………………1
1.3 水蛭有效成分的提取方法…………………………………………………2
1.4 各个方法的研究现状………………………………………………………2
1.4.1 传统方法的研究现状………………………………………………2
1.4.2 酶解提取法的研究现状……………………………………………2
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1.4.3 基因工程表达法的研究现状………………………………………3
1.5课题的确定…………………………………………………………………3
第二章 酶解条件的设计………………………………………………………5
2.1 实验依据……………………………………………………………………5
2.2 实验仪器与材料……………………………………………………………5
2.2.1 实验仪器……………………………………………………………5
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2.2.2 实验材料……………………………………………………………6
2.3 实验对象的预处理…………………………………………………………6
2.3.1 水蛭预处理方法的分类……………………………………………6
2.3.2 水蛭粉末的处理方法………………………………………………7
2.3.3 水蛭唾液腺分泌物的处理方法……………………………………7
2.4 实验模型与参数……………………………………………………………8 [资料来源:http://www.doc163.com]
2.4.1 缓冲溶液的制备……………………………………………………8
2.4.2 抗凝血活性指标的筛选……………………………………………8
第三章 酶解条件的研究………………………………………………………9
3.1 胃蛋白酶酶解条件的研究…………………………………………………9
3.1.1 反应温度对胃蛋白酶催化反应产物活性的影响…………………9
3.1.2 酶底比对胃蛋白酶催化反应产物活性的影响……………………9
3.1.3 反应时间对胃蛋白酶催化反应产物活性的影响……………….10
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3.2 胰蛋白酶酶解条件的研究………………………………………………11
3.2.1 反应温度对胰蛋白酶催化反应产物活性的影响………………11
3.2.2 酶底比对胰蛋白酶催化反应产物活性的影响…………………12
3.2.3 反应时间对胰蛋白酶催化反应产物活性的影响………………13
3.3 碱性蛋白酶酶解条件的研究……………………………………………13
3.3.1 反应温度对性蛋白酶催化反应产物活性的影响………………14
3.3.2 酶底比对性蛋白酶催化反应产物活性的影响…………………14
3.3.3 反应时间对性蛋白酶催化反应产物活性的影响………………15
3.4混合酶体系酶解条件的研究……………………………………………16
第四章 结论………………………………………………………………………18
参考文献……………………………………………………………………………19
致谢…………………………………………………………………………………21
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